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牛肉膏蛋白胨培养基的制备步骤五：加塞和包扎
培养基分装完毕后，在口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能（棉塞制作方法附本实验后面）。
加塞后，将全部用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔培养基名称、组别、日期。

牛肉膏蛋白胨培养基的制备步骤六：灭菌、搁置斜面和无菌检查
将上述培养基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃， 20分钟高压蒸汽灭菌。如因情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。
将灭菌的培养基冷至50℃左右，将棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面长度以不**过总长的一半为宜。
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。

牛肉膏蛋白胨培养基的制备步骤四：过滤和分装
趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无要求的情况下，这一步可以省去（本实验*过滤）。
按实验要求，可将配制的培养基分装入内或三角烧瓶内。分装装置见图Ⅴ-1。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装，其装量不**过管高的1/5，灭菌后制成斜面，如图Ⅴ-2。分装三角量以不**过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装一般以高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。

牛肉膏蛋白胨培养基的制备步骤三：调pH
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7．6。反之，则用1mol/L HCl进行调节。注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。
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